혈구계산판 사용법 - hyeolgugyesanpan sayongbeob

Hemocytometer(혹은 Hemacytometer)를 이용한 cell counting은 일정량의 세포 부유액을 눈금이 있는 hemocytometer안에 넣고 눈금 안에 보이는 cell수를 현미경으로 측정 하여 단위 부피당 세포수를 계산하는 방법이다. Hemocytometer의 눈금은 크게 가로 세로 1mm의 정사각형 9개로 구성되는데, 가운데 중앙의 정사각형은 5개의 선으로 나누어 져 25칸이며, 양 옆의 정사각형은 4개의 선으로 분활되어 16칸이다. 보통 대각선 방향의 1mm칸 네 칸에서 각각 센 다음 평균을 구한다.

1. 실험 과정

1) emocytometer에 cover glass를 덮고 cell을 10μl 취하여 hemocytometer의 v 모양 홈에 주입한다. (모세관 현상에 의해 고루 퍼짐. 1회용 C-Chip의 경우 cover glass는 필요없음)

2) 현미경으로 관찰하면서 cell counter를 이용해 cell을 계수한다.

3) 하나의 square의 부피는 10-4㎖이다.  

4) 이후 MTT assay 등 다른 실험을 할 경우, well에 들어갈 세포 수를 계산하여 희석해 분주하면 된다.